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本制品是基于固相载体可逆化固定(SPRI)技术，使用新型核酸纯化介质包被的磁珠，配合优化的缓冲体系，用于稳定、高效、便捷地从常见酶反应体系中纯化RNA或cDNA。本制品不仅适合手工实验操作，还可用于高通量的自动化移液工作站。

本制品可广泛应用于基因测序以及分子诊断等领域，尤其适用于rRNA去除后或DNase I酶处理后的RNA纯化、体外转录产物纯化及二代测序(NGS)文库构建过程中的RNA纯化。

本RNA纯化磁珠既适用于RNA的纯化，也适用于cDNA或其它DNA的纯化，即本制品不能特异性区分RNA或DNA，但可以通过相应的DNA酶或RNA酶处理后再进行RNA或DNA纯化。本制品也不适用于从细胞或组织中直接提取RNA。

• 本制品操作便捷，回收效率高。本制品使用非常便捷，通常15分钟内即可完成RNA样品的纯化。本制品通常回收率可以达到90%以上，也适用于低浓度RNA的浓缩。
  
• 本制品特异性强、RNA结合量高。本制品结合量高，对不同体系的RNA可以快速进行分离纯化，不易产生非特异吸附，可以快速有效去除未掺入的dNTP或NTP、引物、引物二聚体、盐和其它杂质。
  
• 本制品兼容性强。本制品不仅适用于少量样本的手工操作，也适用于高通量的自动化操作系统。
  
• 本制品安全环保。本制品与传统的RNA回收方法相比，避免了酚、氯仿等有机溶剂的使用，更加安全。

组分	1mL	5mL	20mL	100mL
BalbMag RNA纯化磁珠	1mL	5mL	20mL	100mL
说明书	1份

保存：2～8℃，有效期1年。


本制品的主要操作流程图如1所示。样品中的RNA与磁珠结合，在外界磁场(如磁分离架)的作用下，磁珠与相应溶液可以快速而高效地分离，经洗涤充分去除杂质，最后用洗脱液将RNA从磁珠上洗脱下来，即可获得高度纯化的RNA样品。

图1.BalbMag RNA纯化磁珠的实验流程示意图。



图2.BalbMag RNA纯化磁珠纯化不同长度RNA的效果图。以4条不同长度的携带有T7 Promoter序列的线性化质粒分别为模板，通过T7快速体外转录试剂盒体外转录成RNA，再经RNase free的DNase I溶液消化去除DNA模板后混合，经本制品纯化前后的比较。图中可见RNA的回收效率非常高。实际纯化效果会因实验条件、操作等而存在一定差异，本图仅供参考。

• 需自备无水乙醇和磁分离装置。
  
• 操作过程要严格保证无RNase污染。请戴上口罩和手套操作，尽量防止人体表面的RNase污染样品。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒或耗材呼气或说话，以防RNase污染。对于操作环境中RNase的去除，推荐使用核酸酶喷雾清除剂以去除实验桌、仪器设备表面或其它接触面上的RNase。
  
• 本制品的所用试剂和耗材都要求是RNase-free，操作时应小心，避免被污染。如果耗材可能有RNase污染，可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜，然后高温高压灭菌并烘干。
  
• 本制品避免冷冻、避免高速离心。
  
• 为保证RNA的回收效率，使用前须将磁珠由4℃冰箱取出，或取所需量，待其温度平衡至室温后再使用。
  
• 分装或使用磁珠时，请适当漩涡震荡或反复颠倒以保证磁珠充分混匀。
  
• 80% (v/v)乙醇溶液推荐现用现配，否则后续使用时可能会因为乙醇的挥发而影响回收效率。
  
• 请勿长时间干燥磁珠，干燥过度将导致磁珠的不可逆聚集，从而降低洗脱效率。

• 准备工作：
  
  • 将磁珠溶液从4℃冰箱取出，适当漩涡震荡或充分颠倒以保证磁珠充分混匀，然后取出所需的量，平衡至室温。
    
  • 新鲜配制80% (v/v)乙醇溶液。例如分别量取8mL无水乙醇和2mL超纯水或双蒸水(RNase-free)，混匀后即得约10mL 80% (v/v)乙醇溶液。超纯水推荐使用的无菌无酶超纯水。
    
    • 因为乙醇和水混合后体积会发生改变，所以请勿量取8mL乙醇，加超纯水或双蒸水定容至10mL。
• RNA纯化：
  
  • 将0.5～5μg RNA样本转移到洁净的RNase-free 1.5mL离心管。
    
  • 根据样本体积，参照下表用量加入BalbMag RNA纯化磁珠(使用前务必混匀)，一般磁珠用量是样品体积的2倍。轻柔涡旋震荡或移液器吹打10次混匀，室温孵育5分钟。随后将离心管置于磁力架的磁珠中，室温孵育30秒，小心移除上清。
    

    样品用量(μL)	磁珠用量(μL)
    50	100
    100	200
    150	300
    200	400

    • 磁珠在使用前一定要适当涡旋震荡或吹打混匀。如果希望提升RNA回收效率，可适当增加磁珠用量，延长结合时间。
      
    • 一般情况下磁珠用量为样品体积的1.8～2.0倍，用户也可根据实际测试效果对磁珠用量进行适当的调整。
  • 保持离心管始终处于磁力架中，加入200μL新鲜配制的80% (v/v)乙醇溶液漂洗磁珠，室温孵育30秒，小心移除上清。
    
  • 重复步骤c一次。
    
  • 保持离心管始终处于磁力架中，打开离心管盖，室温干燥至磁珠刚刚出现龟裂状(约5～10分钟)。
    • 磁珠晾干要避免过度干燥，过度干燥会导致RNA的洗脱效率降低。
  • 将离心管从磁力架中取出，加入适量超纯水水(10～30μL)，轻柔涡旋震荡或使用移液器轻轻吹打以充分混匀。
    
  • 室温孵育5分钟。
    
  • 将离心管短暂低速离心后置于磁力架中分离5分钟，待溶液澄清后，小心吸取上清至洁净的离心管中，即完成RNA的纯化。
    
    • 建议转移上清时保留少量液体以免吸到磁珠影响后续实验。纯化得到的RNA极易降解，建议尽快进行下一步实验。短时间内不使用时请置于-80℃保存。

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